Los agentes patógenos conocidos con el
nombre de Brucella abortus y Brucella melitensis provocan dos procesos
morbosos en los rumiantes domésticos: la brucelosis bovina y la
brucelosis ovina y caprina respectivamente, de las cuales expondremos
cuestiones y reflexiones clínico-sanitarias, epidemiológicas y
diagnósticas. Dichas dolencias son zoonóticas, y por tanto son
enfermedades animales transmisibles al hombre.
La brucella melitensis produce en la
especie humana la fiebre ondulante o fiebre de Malta y también es
provocada en menor medida por la Brucella abortus. Sus síntomas son
variables, tales como, hipertermia febril de tipo ondulante o
intermitente, cefaleas, mialgias, artralgias, esplenomegalia,
tumefacción ganglionar etc; son características las fases agudas,
frecuentes recaidas, seguidas de fases crónicas que afectan a diversos
órganos y tejidos.
El aborto no es sinónomo de brucelosis,
pero es la consecuencia más frecuente y mejor conocida de las
brucelosis animales, de ahí la denominación de aborto infeccioso, aborto
epizoótico y enfermedad de BANG a la infección producida por Brucella
abortus. También puede ser responsable del aborto bovino la Brucella
melitensis y más raramente la Brucella suis. En relación a la especie
humana, la brucela más patógena es la melitensis, siendo menos la suis y
menos aún la Brucella abortus.
Brucelosis bovina :
Nos
centramos en primer lugar en la infección brucelar bovina caracterizada
por presentarse en animales sexualmente maduros, con localización
preferencial tanto en el tracto reproductor de hembras como de toros.
Los síntomas cardinales de la brucelosis bovina son los siguientes :
-
Partos prematuros o presentación de abortos en la segunda mitad de la
gestación, por término medio entre el quinto y el séptimo mes de
gestación.
-Retención de placenta.
-Infecciones uterinas.
-Alteraciones en la fertilidad e infecundidad como epílogo y secuela de la infección.
Patogenia de la brucelosis bovina:
La patogenia de las brucelosis de los rumiantes presenta unos caracteres específicos.
En
el ganado bovino, el periodo de incubación varia entre 14 y 180 días .
Cuando las hembras se infectan al principio de la gestación, el
periodo de incubación es más prolongado, en cambio si ocurre en la
segunda mitad de la gestación, el periodo es más corto . En términos
generales, se considera que en las vacas los abortos y la mortinatalidad
fetal ocurre entre las dos semanas y cinco meses después del inicio de
la infección.
Es sabido que la patogenia depende de
la respuesta inmune del animal, siendo la enfermedad provocada por la
interacción entre el sistema inmune y el agente patógeno ( brucella
abortus). El estado inmune de la hembra gestante influye en el tiempo de
incubación de la infección e incluso se puede afirmar que la infección
brucelar no siempre conduce al aborto.
Se ha observado clínicamente que
hembras sexualmente maduras si se infectan con brucella abortus pocos
días antes de la fecundación, abortan con casi toda seguridad. En
cambio, si la infección se produce en periodo avanzado de la preñez, el
feto es expulsado en el plazo normal o se produce simplemente parto
prematuro, aunque no es descartable el aborto si el estado de inmunidad
de la madre es deficiente.
Fuente de infección :
Transmisión horizontal :
Los
flujos vaginales, membranas fetales, leche, fetos y terneros recién
nacidos y demás material virulento expulsado por la vaca recién parida e
infectada de brucella abortus se transmite de forma horizontal a otros
animales bovinos durante el post-parto prematuro o en el post-aborto. El
contagio puede realizarse por diferentes vías : por ingestión, por vía
cutánea o por medio de las membranas mucosas ( ocular, digestiva,
oronasal, respiratoria, genital ).Si la vía de entrada es la oronasal,
que es la más común, las bacterias se adhieren en las células
epiteliales intestinales y se implantan en la submucosa. Ahora bien, las
brucelas al invadir el organismo sea cual sea su vía de entrada, son
transportadas a los ganglios linfáticos más próximos al lugar de
entrada.
Si las brucelas se escapan de la
localización ganglionar, pasan al torrente sanguíneo en un proceso de
fagocitosis protagonizado por los leucocitos neutrófilos y por los
monocitos y macrófagos. Durante esta fase se comportan como bacterias
intracelulares facultativas ,caracterizadas por sobrevivir largos
periodos de tiempo en el interior de dichas células, y estar protegidas
de los anticuerpos humorales y de los mecanismos de la inmunidad
celular.
La circulación de las brucelas por vía hemática (
bacteriemia) provoca persistencia, intermitencia y diseminación
hematógena de las bacterias por todo el organismo, colonizando de forma
acantonada en varios órganos : la glándula mamaria, útero, placenta y
ganglios linfáticos regionales de las hembras y en testículos, epidídimo
y glándulas sexuales secundarias de los toros.
En la fase muda de la infección se
produce una infección latente, persistente e inaparente con la
consiguiente aparición de animales portadores de gran significado
epidemiológico y determinantes de la latencia y cronicidad de la
brucelosis. (Josep María Aymerich Baqués, 1975 ).
Lesiones: Placentitis
Las lesiones
brucelares son evidentes cuando la gestación se ha implantado, ya que
las brucelas tienen un tropismo particular por el útero gestante y la
placenta . El agente etiológico ( Brucella abortus ) se desarrolla
ampliamente en el tejido placentario cuando cuenta con las secreciones
hormonales, estructuras histológicas y el azúcar eritritol como
componente bioquímico afín, determinando crecimiento y multiplicación
brucelar.El azúcar eritritol alcanza niveles altos en el útero grávido,
glándula mamaria y epidídimo de los rumiantes.
A las 72 horas post-infección se pueden
encontrar gran cantidad de brucelas en los trofoblastos coriónicos
produciendo necrosis de los mismos.
En el último tercio de la
gestación los niveles de eritritol uterino se incrementan, ocasionando
una migración masiva de brucelas hacia el tejido vascular del útero,
causando una placentitis y una vasculitis placental. En el útero
grávido, las brucelas provocan una reacción inflamatoria que origina
una placentitis necrótica-purulenta con necrobiosis de las vellosidades
placentarias formada por una capa de exudado fibrinoso purulento que
relaja la unión de la placenta fetal y materna con pérdida de la
garantía del intercambio gaseoso y nutritivo entre ambos tejidos. Esta
relación se hace por medio de los cotiledones fetales, los cuales se
proyectan dentro en las criptas de las carúnculas carnosas, y al fallar
en forma total o parcialmente, entonces el feto siente las deficiencias
nutritivas por la perturbación de la circulación fetal y en
consecuencia la infección brucelar puede provocar el aborto con
expulsión prematura del feto.
Por esta razón y según Fischer lo
esencial en el aborto epizoótico son los procesos inflamatorios en las
carúnculas, de ahí que a dicha enfermedad se la podría designar con el
nombre de caranculitis contagiosa.
Transmisión vertical :
Las
brucelas aparte de la transmisión horizontal, pueden contagiar al feto
por vía vertical ,en el interior del útero a través de la deglución del
líquido amniótico, produciendo lesiones inflamatorias en el estómago,
intestino delgado y en diversos parénquimas con ulterior muerte del
feto.
En las circunstancias de pérdida del intercambio gaseoso y
nutritivo de los tejidos placentarios, la gestación no llega a término
con el feto maduro, o si nace el ternero es débil y falto de vitalidad,
no tardando en morir. Es factible que en la transmisión vertical nazca
un ternero, sano aparentemente, infectado de brucelas y sin anticuerpos
específicos detectables, que al sobrevivir se convierta en animal
portador y se introduzca en la cadena epidemiológica de la infección.En
cuanto al útero vacio (no gestante) resalta que no es un órgano
adecuado para la multiplicación del agente brucelar.
-Retención placentaria:
Ligado al
aborto se presenta muchas veces una entidad nosológica denominada:
Retención placentaria, la cual representa el fracaso en la expulsión de
las membranas fetales, quedando retenidas. Si la placenta permanece en
el lúmen del útero, por más tiempo de 12 horas después del parto, sin
ser eliminada a partir de las 24 horas se considerará como placenta
retenida, clasificándose entonces como patológica o anormal,
debiéndose de abordar su terapéutica adecuadamente.
Mientras que
si en un periodo máximo de tres a ocho horas después de la salida del
feto son expulsadas las membranas fetales se considerará un parto
fisiológico o eutócico (A. E . Monteiro,1.996 ). El mismo autor afirma
que la retención placentaria es una condición patológica en la que
contribuyen varios factores, que le confieren un carácter etiológico
multifactorial, subrayando de que no se puede considerar como una
dolencia en sentido estricto.
Es interesante otra definición del Dr.
Rutter, quien considera que toda placenta que no es eliminada a partir
de las 12 horas es una placenta demorada e incluso es del criterio de
que cuando suceden demoras en la secundinación entramos en un puerperio
patológico. Las adherencias entre las vellosidades coriales y las
criptas cotiledonarias hacen difícil la separación de la placenta del
útero. Recuérdese que los placetomas están formados por la parte materna
, llamada carúncula y la parte de la placenta llamada cotiledón y la
unión de ambas partes es lo que forma el placentoma. Según Grunert,(
1.980 ) la mayor parte de los casos de retención placentaria en los
bovinos es provocada : por el fallo del mecanismo segregación-liberación
de los placentomas, y no por el fallo del mecanismo de la expulsión de
las membranas debido a que al presentarse el aborto las carúnculas y
cotiledones no se encuentran lo suficientemente maduros para llevar a
cabo la expulsión normal de la placenta.
-Puerperio patológico e infecciones uterinas :
En
el puerperio se aprecia que el desprendimiento y expulsión de las
membranas fetales placentarias son la consecuencia de la rotura del
cordón umbilical y las contracciones uterinas. Durante esta fase que
tiene un promedio de duración de cinco a seis semanas, debe normalizarse
la fisiología del aparato reproductor, conseguir la involución uterina y
la reiniciación de la ciclicidad sexual. Es el llamado puerperio total
que el Dr. Rutter lo define por su finalización a las seis semanas y
las modificaciones del endometrio causadas por la gestación ya no
existen y se ha completado la regeneración histológica completa.
Tras
el parto y durante el puerperio, el útero queda relleno de una cantidad
variable de loquios formados por una mezcla de exudados y restos
endometriales y carunculares. Son de tonalidad rosácea o parduzca y se
eliminan de forma progresiva hasta 2-3 semanas después del parto, fecha
en que cesa su eliminación.
Después del aborto brucelar o del
parto prematuro se observa una involución demorada del útero. Es el
llamado puerperio patológico, periodo en el que se pueden presentar las
infecciones uterinas bacterianas. Los loquios clínicamente constituyen
un caldo de cultivo contaminante, a partir del cual se genera la
infección uterina, si ésta no es contenida o fracasan los mecanismos de
defensa uterino. Cuando los loquios tienen un olor fétido, con aspecto
granuloso, líquido o hemorrágico y persiste más allá de las tres semanas
postparto, son indicadores de infección metrítica. Cuando se hacen
amarronadas, amarillentas y seromucosas indican persistencia de la
infección y su paso a metritis crónica ( Miguel Abad, 1.996 ).
Las
metritis puerperales y endometritis causan alteraciones y desequilibrios
hormonales en el área de la reproducción con cuadros clínicos de
infecundidad, infertilidad e incremento del intervalo inter-partos.
Si no son extraidos los placentomas en
su debido tiempo, pueden sobrevenir complicaciones bacterianas por
multiplicación de microorganismos de la putrefacción y piógenos en las
partes retenidas, produciendo metritis e incluso una infección general
séptica.( Salvador Maneu, 1.975 ). Después de una distocia o retención
placentaria por un agente infeccioso, la proliferación bacteriana se
incrementa, con la proliferación de bacterias patógenas, evolucionando
hacia una metritis purulenta ( metritis crónica ) ( Rutter, 2.009 )
Miguel Abad, (1.996) corrobora que la
retención de la placenta va asociada frecuentemente a infección uterina
, y para que exista infección tiene que haber presencia de
adherencias a la mucosa de organismos patógenos, colonización,
penetración de los mismos en el epitelio y/ o liberación de toxinas
bacterianas.( Rutter, 2.009 ).
Se ha comprobado como del 50 al 90%
de los casos de retención placentaria cursan con formas más o menos
graves de metritis, mientras que tras el parto eutócico sin retención de
placenta salvo casos excepcionales, este porcentaje puede hallarse
entre el 5 y el 15%.
En cuanto al toro, la infección brucelósica se
traduce por lesiones inflamatorias de los testículos, epidídimo y
vesículas seminales. Estos órganos contienen focos necróticos o abscesos
focales: orquitis aguda o subaguda que generalmente es unilateral, y
epididimitis. Los toros enferman más raramente que las hembras, y
muestran inapetencia y poco o ausencia de deseo genésico ( falta de
libido ).
-Epidemiología- Animales portadores y unidades epidemiológicas :
Siempre
se debe tener en cuenta que el vaciamiento del útero después del aborto
o de la interrupción de la gestación no equivale a la desaparición o
esterilización de la brucella abortus, ya que si bien a los dos meses
las brucelas ya no se encuentran en el útero, en cambio sí se hallan
acantonadas en glándulas mamarias y ganglios linfáticos retromamarios e
ilíacos, permaneciendo en ubre en estado latente hasta que la vaca queda
nuevamente gestante. Por tanto, las brucelas acantonadas en ubres,
ganglios linfáticos, etc. representan la fase muda de la infección, (
animales portadores e inaparentes ), son el gran peligro epizoótico, y
tras nueva fecundación, pueden implantarse de nuevo por vía hemática en
el útero y placenta, repitiéndose de nuevo el ciclo abortivo o los
partos prematuros..
- En las explotaciones recién infectadas y estudiadas como unidades
epidemiológicas, los casos de abortos brucelares se suceden al
principio , con poca persistencia, y posteriormente con mayor
frecuencia, ya que el agente patógeno se transmite intra-rebaño al
encontrar animales sensibles y receptivos a dicho microorganismo.
- Si en un rebaño infectado , antes del sacrificio de los animales
positivos, se repuebla con reses nuevas de otro rebaño libres de
brucelosis, se transmite el agente patógeno a los animales instalados
de nuevo y la epizootia se mantiene de forma permanente .Este ejemplo
es típico de anarquía sanitaria y es lo que se conoce reglamentariamente
como rebaño B1, en base a que se desconocen los antecedentes clínicos,
vacunales y serológicos del censo de la explotación.
- En cambio, si el efectivo bovino afectado positivamente es
sacrificado, y se sigue un criterio sanitario instaurando, primero: un
control sanitario con medidas generales de higiene en las explotaciones y
parideras, segundo: implantar un programa inmuno- profiláctico con la
aplicación de la vacuna viva de la cepa lisa B19 a las terneras entre 3
y 6 meses de edad , y tercero : realizar un chequeo serológico de la
totalidad del efectivo de una edad superior a los 18 meses en caso de
que los bovinos estén vacunados y en el supuesto de que no haya
animales vacunados practicar el exámen serológico en los animales con
edad superior a los 12 meses y entonces si no aparecen animales
seropositivos, es cuando se puede determinar la repoblación. Se trata
en este segundo ejemplo de los rebaños actualmente clasificados com B2.
En el seguimiento sanitario de las
explotaciones bovinas en la provincia de Girona, igual que en el resto
de Cataluña en las dos últimas décadas del siglo XX se comprobó la alta
prevalencia de brucelosis y sus dificultades diagnósticas, por diversas
razones y una de éllas es la de que la vacuna empleada -cepa viva B19
-es inmunógena y aglutinógena e induce a la formación de anticuerpos
postvacunales que pueden interpretarse como anticuerpos postinfecciosos o
a la inversa y confundir e interferir el diagnóstico. Recordaremos que
en la respuesta inmunitaria vacunal aparecen las primeras
inmunoglobulinas ( Ig M ) al cabo de 5-7 días de la vacunación,
alcanzando la concentración máxima a las 3 semanas, para aparecer a
continuación las inmunoglobulinas ( Ig G ), evolucionando con rapidez
entre la cuarta y sexta semana para desaparecer unos seis meses después
da la vacunación. En la práctica ordinaria del ejercicio de la profesión
veterinaria era habitual encontrase con la incertidumbre para emitir un
diagnóstico certero a causa de la duda existente en que si la
aglutinación era provocada por la cepa vacunal o por el microorganismo
patógeno . A efectos prácticos, las muestras problema del ganado vacuno
sometido a exámen serológico con Rosa Bengala, el veterinario clínico
se encontraba que algunas muestras que daban resultado positivo ,y
había la duda de que lo fuesen realmente, o únicamente se trataba de
falsos positivos. La causa de la duda consistía en que la prueba de Rosa
Bengala no distinguía entre anticuerpos aglutinantes si eran
postvacunales o postinfecciosos.
La interpretación correcta de los
signos clínicos, cuadro lesional e historial de la explotación en
principio eran básicos para clasificar el último caso del rebaño como B2
y al propio tiempo continuar en la ardua tarea de lucha y erradicación
de la bucelosis bovina (Real Decreto 1047/2003, de 1 de agosto,en lo
que se refiere a la clasificación sanitaria de las explotaciones
bovinas, ovinas y caprinas respecto a la brucelosis). En estas
circunstancias, era imprescindible reducir la alta prevalencia, tanto
del número de rebaños como del número de cabezas de ganado, subiendo
escalones sanitarios y conseguir rebaños B3 y B4 o rebaños indemnes y
oficialmente indemnes de brucelosis respectivamente. En las
explotaciones B3,las hembras han sido vacunadas antes de los 6 meses de
edad , con vacuna viva de la cepa B19. Si estos rebaños tienden a la
consecución de ser rebaños B4 quedarán excluidos de la vacunación. En
los rebaños B4, los bovinos no han sido vacunados contra la brucelosis,
con excepción de las hembras vacunadas al menos tres años antes. Omito
el resto de la normativa, que a pesar de su interés nos alejaría de la
exposición presentada. El hecho diferencial en la clasificación
sanitaria de los rebaños respecto a la brucelosis radica en que las
explotaciones oficialmente indemne de brucelosis ( B4 ) y las indemne
de brucelosis ( B3 ), están exentas de la vacunación obligatoria.
Teniendo en cuenta que el 99.8 % de los
rebaños de producción bovina de nuestras comarcas son indemnes y
oficialmente indemnes a la brucelosis, se continua la lucha con el
objetivo de obtener una tasa inferior a 0.2 % de prevalencia y se
alcance la erradicación de la enfermedad, prohibiendo la vacunación
antibrucelar en cualquier tipo de rebaño. La clasificación sanitaria de
los rebaños nos da una visión global del status sanitario de los
bovinos, e incluso del status productivo y la satisfacción del hecho de
conseguir una conciencia colectiva en la lucha contra las enfermedades
de los animales.
Brucelosis ovina y caprina :
Recuérdase
que en España en el año 1991, la prevalencia de rebaños afectados de
brucelosis ovina y caprina era del órden del 28.5% y en cuanto a
animales afectados se situaba alrededor del 3 %. En el año 2.010, la
prevalencia de brucelosis en los rebaños está situado en 1.64% y en
cuanto al número de cabezas ( animales) es del órden del 0.11%. Estos
datos tienen un significado crucial: España cuenta con un ganado ovino y
caprino prácticamente saneado en su totalidad y que los casos de
brucelosis humana, se han reducido continua y paralelamente como
consecuencia de la baja prevalencia de la brucelosis del ganado (ovejas y
cabras). Con esta síntesis estadística se comprueba que la brucelosis
ovina y caprina, reviste el máximo interés tanto desde el punto de vista
de la Sanidad Animal como de la Salud Pública.
Patogenia de la brucelosis ovina y capina :
A
continuación se relatará su patogenia, en donde señalamos varios puntos
de interés: que el periodo de incubación varía de 15 días a varios
meses y que durante la fase de gestación, las brucelas pueden invadir
el útero para a posteriori multiplicarse en placenta y feto lo que
favorecerá el aborto o el nacimiento de corderos o cabritos infectados.
La fuente de infección son los animales infectados que tras el parto o
aborto son excretores de brucelas, contaminando su hábitat y la
población animal (ovejas y cabras).
Los animales pueden contraer la
enfermedad por vía oral, nasofaríngea, cutánea o por las mucosas. El
contagio por la piél o mucosas es habitual en los establos profusamente
infectados en que la glándula mamaria y la piél de los miembros
posteriores están en contacto permanente con las camas infectadas. Las
ocasiones de contagio o contaminación del entorno animal son sobre todo
importantes durante los abortos, a causa de la excreción de estas
bacterias por las descargas uterinas y vaginales, como también por la
leche y orina en los primeros días del aborto.
En las ovejas y cabras hay dos fases
totalmente encontradas: una fase bacteriémica, con una duración de 30 a
50 días, en la que las brucelas se hallan circulantes en el torrente
sanguíneo, fagocitadas por los leucocitos neutrófilos y por células del
sistema retículo-endotelial, y otra fase, caracterizada por raptos
bacterianos, en que las brucelas se hallan acantonadas en células del
sistema linfoideo e hígado, bazo, ubres, articulaciones, etc. Las
brucelas por esta propiedad son consideradas como bacterias
intracelulares facultativas.
Cuadro clínico - Ovejas :
Los
sintomas brucelósicos de las ovejas, en la mayoría de los casos, la
enfermedad evoluciona sin síntomas patognomónicos, y se la sospecha
clínicamente cuando en rebaños recién infectados se suceden rápidamente
los casos de aborto. Es la conocida tormenta de abortos, por la
particular afinidad que tienen las brucelas por el endometrio grávido y
por la placenta fetal, provocando la relajación entre la placenta fetal y
materna, con el consiguiente transtorno en la nutrición del feto, que
puede acarrear poco a poco la muerte del feto y su expulsión o el
nacimiento de corderos infectados.
La principal manifestación clínica
de la infección brucelar ovina es el aborto que se produce durante el
último tercio de la gestación o puede haber el nacimiento de animales
prematuros poco viables con el consiguiente incremento de mortalidad
perinatal.( Blasco, J. M. , 2004 ).
Cuadro clínico - Cabras :
Los
síntomas en las cabras, tampoco son patognomónicos, tales como abortos
ocurridos mayoritariamente en el último tercio de la gestación. El
aborto lo provoca la migración masiva de brucelas hacia el tejido
vascular del útero, causando una placentitis y vasculitis placental,
alterando la circulación fetal y desencadenando el aborto en las cabras
.En los partos brucelares en que las cabras no expulsan la placenta,
quedándose retenidas, repercute en la proliferación de gérmenes de la
putrefacción causando metritis e incluso septicemias y la muerte del
animal. Por último, en el área reproductiva se aprecia infertilidad
como otra consecuencia patológica de la infección.
Los machos cabrío y morueco con la lesión testicular (orquitis) transmiten dicha bacteria a las hembras en la fecundación.
-Epidemiología - Animales portadores e inaparentes y unidades epidemiológicas :
En base a la transmisión vertical las
madres infectadas de brucella melitensis paren porcentajes importantes
de corderos o cabritos aparentemente sanos que inmunológicamente son
seronegativos y bacteriológicamente son portadores y excretores de dicho
agente patógeno. Son los llamados animales portadores inaparentes, con
infección latente que sufren el fenómeno de tolerancia inmunológica,
representando un gran peligro de contaminación ambiental y
epidemiológico, tanto para la especie humana como la animal por ser una
fuente de infección de primer órden.
Es interesante reseñar las formas
clínicas de brucelosis crónicas, caracterizadas por ser asintomáticas
y/ o inaparentes, las hembras reproductoras se convierten en animales
portadores y de dichas madres nacen corderos o cabritos aparentemente
sanos, pero persistentemente infectados por la acción patógena de la
brucella melitensis . Representan un factor de transmisión en la
eliminación y transmisión de la brucelosis. La leche de las cabras
infectada, como material virulentos cuentan con una alta carga brucelar
durante un año o más y son fuente de infección.
Respecto a las hembras no preñadas con
infecciones crónicas del sistema retículo-endotelial se convierten en
portadores latentes, y por tanto son fuente de infección para el resto
de los animales no inmunizados. Aparte de los medios tradicionales de
contagio, los animales pueden infectarse por inhalación de polvo de los
establos contaminados de brucella melitensis. Cada vez resulta más
frecuente que explotaciones de ganado bovino saneadas de Brucella
abortus, localizadas en las proximidades de rebaños de ganado ovino o
caprino, sufran brotes importantes de infección por Brucella melitensis.
( Blasco, J. M., 2.004 ) .
Los abortos, aunque no representen con
certeza un cuadro patognomónico de la enfermedad, sí constituyen la
fuente de infección principal, que se disemina de forma horizontal sobre
todo durante la paridera, y no sólo dentro de la propia explotación, si
no también entre otras explotaciones o rebaños (pastos comunes, puntos
de agua, vías pecuarias, etc.). ( Durán-Ferrer, M . 2010). Los pastos en
común de rebaños exentos de brucelosis con ganaderías infectadas o
que se desconoce su status sanitario no pueden mezclarse, se debe
impedir y prohibir la entrada de animales infectados en dichas áreas,
tal como está legislado.
Retornando al Real Decreto 1047/2003,
de 1 de agosto, referentes a la clasificación sanitaria de las
explotaciones ganaderas vemos una vez más que ocupan un lugar destacado
en el tema brucelar las explotaciones de ovino y caprino. La
metodología de trabajo es similar a lo visto y estudiado con el
vacuno : las clasificaciones de rebaños de ovino y caprino M1 y M2 se
basan en los mismos conceptos técnicos, que lo expuesto en la
calificación B1 y B2 del ganado bovino , por lo que omitimos su
definición, aunque se destaca que en general resulta difícil el manejo
de los rebaños de ovejas y cabras por la idiosincrasia pastoril, la
práctica de la trashumancia, el aprovechamiento de los pastos
comunales, subproductos agrícolas,etc., sin embargo y a pesar de dichos
condicionantes se logró la formación de agrupaciones de defensa
sanitaria y unidades epidemiológicas que han servido de base para
desarrollar el señalado Real Decreto en la primera década del siglo XXI.
Históricamente en los años 70 y 80 del
siglo XX, faltó voluntad política y sentido de asociacionismo ganadero
en la lucha contra la brucelosis en todas las especies animales
sensibles. Sin embargo, hubo voluntad técnica desde las Jefaturas
provinciales de Ganadería, pero no fue suficiente.
En esta época los
animales de reposición se inmunizaban con la vacuna Rev-1 antes de la
edad de 7 meses, entre los 3-6 meses de vida. La vacuna a pesar de su
teóricamente capacidad abortiva, también se utilizó en las ovejas
adultas y gestantes, a dosis completa y/o reducida.
Se constata
además, que el sector ganadero durante estas décadas no tuvo apoyo
presupuestario de la Administración para que se formalizara un plan de
lucha contra la brucelosis basado en la vacunación, diagnóstico
serológico y sacrificio de los animales seropositivos .Técnicamente hubo
grandes avances en los planes de inmunización, pero no se legisló
profusamente en la lucha contra la brucelosis ovina y caprina, con
vacíos legislativos por no incluir programas de control, vigilancia
epidemiológica y erradicación.
La situación cambió a partir de
la década de los 90 del siglo pasado cuando España ya fué miembro de la
Unión Europea, armonizando la legislación sanitaria española con la
europea. Los nuevos planes españoles de lucha contra la brucelosis
ovina y caprina consiguieron fondos de cofinanciación europea para
controlar y erradicar dicha enfermedad. Los resultados fueron evidentes y
la reducción porcentual de rebaños de ovejas y cabras M1 y M2 fué
palpable.
La obligatoriedad a la vacunación contra la brucelosis
por Brucella melitensis a las hembras de reposición comprendidas entre
los tres y seis meses de edad con la vacuna Rev-1 en concentraciones
comprendidas entre 1 y 2 por 10 elevado a 9 U. F. C. fué una base para
que la situación sanitaria diese un giro, facilitando que la escalada
sanitaria subiera a mayor nivel, alcanzándose rebaños M3 y M4 (rebaños
indemnes y oficialmente indemnes de brucelosis ). Los rebaños M3
obtienen este título de indemnes de brucelosis previo diagnóstico
serológico, con resultado negativo por dos veces a las pruebas de Rosa
Bengala y Fijación de Complemento en un intervalo de seis meses como
mínimo, a todos los animales no vacunados y que tuvieran más de seis
meses en el momento de la prueba. Todos los animales seropositivos son
sacrificados. El seguimiento del plan cuajó en un incremento porcentual
de rebaños M3 sin evidencias ni signos clínicos de la enfermedad. Por
último, se han logrado rebaños M4 u oficialmente indemnes de brucelosis,
en donde los animales ya no se les vacuna contra la Brucella
melitensis, con la vacuna Rev-1 ni con ninguna otra. La exención de la
vacunación de los rebaños indemnes y oficialmente indemnes de brucelosis
( M3 y M4 ), manteniendo la obligatoriedad vacunal en los rebaños M1 y
M2 en las hembras de reposición entre tres y seis meses de edad ha sido
un hito en el último lustro.
La estrategia para el año 2011 está
basada en alcanzar la erradicación de la enfermedad en territorios de
baja prevalencia (99.8% de rebaños oficialmente indemnes de brucelosis
), como es el caso de Cataluña, en un corto plazo de tiempo, donde se
encuentran sin casos confirmados de brucelosis durante los últimos años,
en que se realiza el chequeo serológico con una frecuencia mínima de
una prueba anual en el 100% de los animales, con sacrificio de los
seropositivos si los hubiere y siguiendo toda la normativa vigente al
respecto. La actual estrategia vacunal consiste en inmunizar las hembras
de reposición entre tres y seis meses de edad en comarcas de alta
prevalencia y prohibir la vacunación en los territorios de baja
prevalencia, sea cual sea su clasificación sanitaria, es decir, todos
los rebaños de ovejas y cabras estarán exentas de la vacunación
antibrucelar. El futuro dará explicación de la bondad o no de esta
determinación. Hoy es tema de discusión.
No quiero omitir los trabajos del
investigador español Dr Blasco, quién con sus trabajos de la Brucella
melitensis en ovejas y cabras ha desdramatizado la vacunación con la
vacuna Rev-1 y ha demostrado junto a otros investigadores que la
mencionada inmunización por vía conjuntival detiene drásticamente el
proceso de transmisión y diseminación de la brucella melitensis,
evitando consiguientemente la aparición de animales portadores. Asimismo
comprobó que en situaciones endémicas de brucelosis en cabras adultas
la vacunación con Rev-1 a intervalos regulares es la vía más práctica
para controlar la enfermedad.
Diagnóstico de laboratorio :
El
diagnóstico de una enfermedad como la brucelosis que no cuenta con
signos patognomónicos, que le pudiesen caracterizar, y que incluso el
aborto que presenta es un problema que está sujeto al diagnóstico
diferencial con otros agentes etiológicos infecciosos, tales como:
Trichomona Foetus, Campylobacter foetus,que tienen suma afinidad sobre
sobre la unidad fetoplacentaria provocándoles lesiones que confluyen en
un aumento de la motilidad uterina y expulsión del feto (aborto ).
Desgraciadamente todavía hay más microorganismos que sin tener afinidad
especial con el útero gestante, presentan una acción patógena de tipo
septicémico que causa el aborto. Entre estos microorganismos se hallan:
Leptospira spp., Rickettsia spp., Samonella spp., Chlamydia spp.,
Corynebacterium pyogenes, etc. Esta pluralidad etiológica no nos permite
precisar en el diagnóstico clínico de la enfermedad y por éllo se
considera que el diagnóstico científico de laboratorio dé la pauta para
la confirmación de la sospecha clínica de brucelosis. En el exámen
laboratorial de la brucelosis bovina, ovina y caprina se pueden seguir
dos caminos:
A-Método directo o puesta en evidencia del agente patógeno.
B-Método indirecto o puesta en evidencia de los anticuerpos.
A) El método directo
comprueba la existencia del agente patógeno, igual de la brucella
abortus como de la brucella melitensis. Lo hace por medio de:
-Exámen microscópico/ Tinción
-Cultivos bacterianos ( diagnóstico bacteriológico )
A.1.- Exámen microscópico / Tinción :
El exámen bacterioscópico
presta un gran servicio cuando la epidemilogía, los síntomas y lesiones
evocan una etiología brucelar. Los frotis realizados a partir de
cotiledones permiten descubrir las brucelas por el método de GRAM, STAMP
o KOSTER. Las brucelas se observan después de la tinción y
microcópicamente aparecen pequeños cocobacilos , gram-negativos,
coloreados en rojo cereza, aunque el fondo de la preparación es
azulado,que se disponen aislados o agrupados en amas entre las células o
en el interior de las mismas, más frecuentemente son intracelulares.
Sus dimensiones oscilan entre 0,6-1,5 micras de longitud por o,5-0,7
micras de anchura. No son ácido-alcohol resistente en sentido estricto,
pero son resistentes a la decoloración por ácidos débiles, por lo que se
tiñen de rojo por el método modificado de Ziehl-Neelsen ( Stamp ).
Esta prueba permite ofrecer
un diagnóstico presuntivo, por tanto, no es definitivo, ya que las
coloraciones descritas son parecidas o similares a otros gérmenes
patógenos : Coxiella burnetti y Chlamidophila abortus.
A.2.-Diagnóstico bacteriológico :
En las campañas de
saneamiento ganadero habitualmente no se recurre a dicho método, aunque
se cuenta con el soporte y la gran labor científica de: El Laboratorio
Central de Sanidad y Producción Animal del Ministerio de Agricultura ,
ubicado en Santa Fe ( Granada ), el cual es el Laboratorio Nacional de
Referencia para las Brucelosis animales en España.
El diagnóstico laboratorial
de la brucelosis ovina y caprina es evidente que el exámen directo o
bacteriológico no es práctico en las situaciones de campañas de
saneamiento ganadero, sin embargo hay que tener en cuenta que las
secreciones vaginales tras el parto o aborto, la leche y el esperma son
las muestras recomendables para el cultivo bacteriano, que sólo se hará
en laboratorios especializados. Es mejor cultivar las muestras con
medios selectivos (Thayer-Martin modificado ) y en caso de crecimiento
bacteriano, las colonias de brucelas en aislamiento primario no suelen
ser visibles hasta los 3-5 días de incubación. Para la identificación de
las colonias aisladas las pruebas bioquímicas de oxidasa y ureasa que
hayan dado resultado positivo, junto a la tinción de unos frotis de
muestras patológicas por el método GRAM, STAMP o KOSTER con observación
microscópica de cocobacilos gram-negativos son suficientes para
garantizar un diagnóstico certero de brucelosis.( Durán- Ferrer,M.
2010).
Respecto de las muestras sospechosas
de brucelosis bovina el Laboratorio Nacional de Referencia de las
Brucelosis Animales de España da las siguientes orientaciones a los
Servicios Veterinarios de las Comunidades Autónomas españolas :
- Animales del rebaño susceptibles de investigación
bacteriológica: Los animales de elección del ganado bovino, para
intentar el aislamiento de Brucella son los animales abortados o con
sospecha de aborto y, en los rebaños con sospecha de infección crónica,
los animales paridos de primer y segundo parto.
- Período en el que debe realizarse el muestreo: Habrá de tenerse en
cuenta que la excreción de brucelas por secreciones vaginales es
continua y masiva durante los 15 días que siguen a un aborto o parto con
excreción, pudiendo durar hasta 60 días y que la eliminación por leche
puede ser también masiva y continua durante las dos semanas siguientes
al parto, pero también puede ser poco intensa y discontinua, incluso en
algunos animales. Asimismo las hembras abortadas expulsan grandes
cantidades de Brucelas con el feto, el líquido amniótico y las membranas
fetales y son fuente primaria de infección.
- Toma de muestras en el animal vivo :
- Leche procedente de vacas, ovejas y cabras de producción lechera :
- Vagina :Se utilizarán escobillones estériles que se sembrarán preferentemente el mismo día de su recogida.
- Sangre :Solamente en fase septicémica.
- Membranas fetales : Se tomarán muestras tanto de cotiledones lesionados como de aquellos aparentemente sanos
- Fetos abortados : Se tomará muestra de contenido estomacal con preferencia.
- Toma de muestras en el cadáver (necropsia): La posibilidad de
aislamiento del agente etiológico se incrementa si la toma de muestras
se realiza en las proximidades del aborto o parto.
Preferentemente se investigarán :
- Ganglios mamarios e ilíacos, mama y útero en las hembras y en el sémen, epidídimo y glándulas accesorias en el macho.
-Ganglios retrofaríngeos y parotídeos.
- Medios de cultivo :La mayoría de las especies de brucelas crecen
sin dificultad en medios ordinarios. Sin embargo, debido a la gran
contaminación que suelen tener todas las muestras por bacterias de
crecimiento rápido, es necesario emplear medios selectivos para el
aislamientpo primario. Los medios selectivos más usuales son el medio de
Farrell y el medio de Thayer-Martin modificado.
- Identificación de Brucella:
- Morfología y tinción : Véase apartado A.1.- Exámen microscópico / Tinción.
- Observación de las colonias: Las especies de Brucella de colonias
lisas tienen tendencia a sufrir disociación durante su crecimiento.
Estos cambios morfológicos están asociados con variaciones en la
virulencia y antigenicidad. Las colonias lisas son generalmente
patógenas mientras que las variantes rugosas son de menor virulencia y
de menor poder antigénico.
- Pruebas bioquímicas :
Las brucellas son :
Catalasa positivas
Oxidasa y ureasa positivas
B ) - Métodos
indirectos o diagnóstico serológico de la brucelosis bovina, ovina o
caprina se basan en la detección de anticuerpos humorales específicos
de brucella abortus o de brucella melitensis del suero sanguíneo de
bóvidos, óvidos y/o cápridos.
El fundamento inmunológico de las
técnicas serológicas son comunes en la metodología de aplicación, salvo
pequeñas variaciones, igual para el ganado vacuno como para el ovino y
caprino. Revisaremos conjuntamente el diagnóstico serológico de la
brucelosis de los grandes y pequeños rumiantes.
Las técnicas que se pueden utilizar son las siguientes :
- Seroaglutinación lenta en tubo
- Seroaglutinación rápida en placa
- Ring Test o prueba del anillo de leche
- Ensayo de fluorescencisa polarizada
- Inmunofluofluorescencia
- ELISA ( Enzimoinmunoanálisis de adsorción)
- Prueba de Fijación de complemento.
De dichas pruebas serológicas destacan
las pruebas de Rosa Bengala y la Reacción de Fijación de Complemento. Se
realizan cotidianamente y son una de las bases de los planes de lucha y
erradicación de la brucelosis del ganado bovino, ovino y caprino,
aunque se ensayan el resto de pruebas con el fin de estudiar la
sensibilidad y especificidad de cada una de éllas.
- Rosa Bengala: El antígeno de Rosa Bengala está constituido por
células en suspensión en una solución de pH ácido, que aglutina
específicamente cuando es reconocido por los anticuerpos presentes en la
muestra problema.
La interpretación de los resultados se expresará con el siguiente criterio :
Resultado POSITIVO : los sueros que presentan aglutinación.
Resultado NEGATIVO : los sueros que presentan ausencia de aglutinación.
Esta técnica se emplea
frecuentemente como prueba screening, pero con resultados, a veces
dudosos, de sensibilidad y especificidad, ( porcentajes de falsos
positivos y falsos negativos respectivamente ). Entre los mismos, suele
haber en ciertos casos, enfermos de brucelosis crónica, que tras el
exámen con la técnica de Rosa Bengala nos da un resultado negativo.
Dicha negatividad serológica está causada por la desaparición de los
anticuerpos aglutinantes y si no se continuase la investigación y no se
comprobase con otras pruebas serológicas ( prueba de fijación de
complemento ) y estudio clínico y epizootológico, este animal que real y
clínicamente es un animal positivo a la brucelosis sería una fuente de
infección para otros individuos. Realmente estamos ante un caso de un
Reactor serológico falso negativo. El ejemplo presentado demuestra que
la prueba de Rosa Bengala presenta una baja sensibilidad frente la
cronicidad de la infección brucelósica.
- Prueba de Fijación de Complemento : Esta técnica permite sacar las
dudas de los resultados de screening de la técnica de Rosa Bengala. Es
una prueba confirmatoria.
El fundamento de la técnica
es el siguiente : se incuban el antígeno y el suero problema con previa
inactivación y supresión del complemento sérico. Se añade el complemento
de cobaya. Tras la reacción de los tres reactivos ( antígeno, suero y
complemento de cobaya), se mide la cantidad de complemento libre
mediante la incorporación del sistema hemolítico formado por eritrocitos
de cordero recubiertos de anticuerpos ( hematíes sensibilizados).
El resultado de la técnica
estará en función del grado de hemólisis. La muestra será POSITIVA
cuando haya ausencia de hemólisis con sedimentación de los hematíes en
el fondo del pozo de la placa, lo que significa que la muestra presenta
anticuerpos específicos fijadores del complemento. En cambio será una
muestra NEGATIVA cuando el sobrenadante es translúcido y hay ausencia
del botón rojo en el fondo del pozo, lo cual es la demostración de que
en la reacción ha habido hemólisis, y por tanto no existen anticuerpos
fijadores de complemento.
Para la titulación de los
resultados existen unos parámetros y ecuaciones que dan las
valoraciones cuantitativas de las muestras positivas y una valoración
cualitativa de las muestras negativas.
Un suero problema es positivo
cuando contenga 20 ó más unidades internacionales de prueba de fijación
de complemento por mililitro, dicha titulación es el punto de corte.
Las muestras con títulos inferiores a 20 U. I. por ml. son consideradas
negativas.
La prueba cutánea de la
brucelosis con el antígeno Brucelina es una prueba complementaria y de
las más específicas para la detección de esta enfermedad en animales no
vacunados. Asimismo, los bóvidos que hayan dado un resultado positivo en
una de las pruebas serológicas definidas podrán someterse a una prueba
cutánea para corroborar la interpretación de los resultados de las
pruebas serológicas, especialmente cuando no pueda excluirse una
reacción cruzada con anticuerpos de otras bacterias en el caso de los
rebaños indemnes de brucelosis u oficialmente indemnes de brucelosis.
Para finalizar destacamos que las
brucelas desde un punto vista veterinario, son un quebranto en la
fisiopatología de las glándulas sexuales, perturbando numerosas
aplicaciones zootécnicas de la Fisiología de los animales domésticos,
alterando la dinámica reproductora de ambos sexos, de una manera más o
menos profunda, según se trate de las hembras o de los machos
respectivamente y la Veterinaria que está entregada a los campos da la
Medicina animal, Sanidad Animal y Salud Pública lidera con éxito la
lucha en la erradicación de la brucelosis como enfermedad animal
transmisible a la especie humana ( zooantroponosis ).
BIBLIOGRAFIA :Maneu
Soriano, Salvador ( 1.975 ).- Estudio clínico de la brucelosis.- XIV
Symposium Regional de Cataluña y Baleares sobre Patología infecciosa
veterinaria
Querol Sanchis, Joaquim ( 1.975 ).- Diagnóstico
clínico y laboratorial de la brucelosis.- XIV Symposium Regional de
Cataluña y Baleares sobre Patología infecciosa veterinaria.
Aymerich
Baqués, Josep María ( 1.975 ).- Terapéutica e inmunoprofilaxis de la
brucelosis.- XIV Symposium Regional de Cataluña y Baleares sobre
Patología infecciosa veterinaria.
Ministerio de Medio Ambiente, y
Medio Rural y Marino (2.009 ).- Orden ARM/166/ 2.009, de 29 de julio,
por el que se regulan los programas nacionales de erradicación de
enfermedades de los animales.
Laboratorio de Sanidad y Producción
Animal. M. A. P. A. ( 1.996 ).- Orientaciones para el diagnóstico
bacteriológico de la Brucelosis.
Abad Gavín, Miguel ( 1.996 ).-
Mecanismos de defensa uterinos.-Volumen XVII: Bovino: Aspectos de
Patología reproductiva y seminología.
